PCR星空xingkong(中国)又称基因扩增星空xingkong(中国),是分子诊断的基础,也是进行PCR实验的必备场所。近年来因分子诊断领域的不断发展,如何规划一个合格的星空xingkong(中国)是每一个pcr从业者首先要遇到的问题。
1、如何才能设计一个合格的PCR星空xingkong(中国)呢,简单的说就是:各区独立,注意风向,因地制宜,方便工作,同时也要注意标本的接收问题。
首先星空xingkong(中国)来看各区独立。其含义就是PCR星空xingkong(中国)的四个区域(如果使用实时荧光定量PCR,则只需要三个区,因为扩增和产物分析可以在同一个区域内解决)即试剂准备区,标本制备区,扩增区和产物分析区,应该在物理上完全分开的各自独立的区域,并且不能有连接各个区域的中央空调等会导致空气流通的情况。物品的传递应采用高密封度的传递窗,一个合格的传递窗应该是双开门的结构,当一侧打开时另外一侧自锁无法打开,且舱内应配套紫外灯消毒功能,这样就可以高效避免交叉污染。
第二是注意风向。由于PCR对原始靶核酸的扩增有一个指数级的增长,当检测有阳性后,假如在开放式的环境下,很容易就形成了所谓的“气溶胶污染”,为了防止这种污染的发生,就需要注意各星空xingkong(中国)区域内的气流。一般来说,星空xingkong(中国)的空气流通采用正压或者负压,按照试剂准备区→标本制备区→扩增产物分析区方向空气压力递减的方式进行通过压差控制,使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染,并且降低扩增产物对人员和环境的污染。
各个星空xingkong(中国)与非洁净区之间的闸间保持正压,>10Pa,实验与闸间之间的气流组织方向为:试剂准备区空气流向闸间,标本制备区流向闸间,而PCR扩增区气流方向由闸间流向PCR扩增区,纯化区同理;同时按照试剂单向流方向,各个星空xingkong(中国)之间设计不同压力梯度来实现单向气流组织方向,由试剂准备区(+20Pa)、标本制备区(+15Pa)、扩增反应一区(-5Pa)、纯化区(-10Pa)、扩增反应二区(-20Pa)、到后纯化区(-25Pa)压力逐渐降低,形成单向负压压力梯度。
第三就是因地制宜。PCR星空xingkong(中国)不是千篇一律的,要分析具体的情况制定符合自己当前的需求,合乎国家的标准即可,不必强求理想状态。
最后是方便工作。PCR星空xingkong(中国)的建立离不开以人为本,在做到防止污染的情况下,应最大限度地考虑在日常检测工作时是否方便。星空xingkong(中国)的过道能否方便日后新设备的进出,人员工作服和工作鞋的换穿是否方便。
2、星空xingkong(中国)的区域规划好之后,根据需求星空xingkong(中国)可以进驻一下主要的实验用品及耗材。按照星空xingkong(中国)的需求放置试验台,天平、冰箱、低温冰箱、离心机、洗眼器、加样器、振荡器、紫外灯、冰箱、生物安全柜(或洁净工作台、或者排风柜排毒柜)、恒温水浴、上下水设备、废弃物容器、通风排风系统、水浴箱、核酸提取设备、实时荧光定量PCR仪等。
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